Plasmide Double Nickase (h) GHRH: sc-404753-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GHRH correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GHRH Double Nickase (h) et le plasmide GHRH Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GHRH. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GHRH | sc-404753-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GHRH | sc-404753-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **GHRH** code l’hormone de libération de l’hormone de croissance (GHRH), un neuropeptide hypothalamique qui se lie au récepteur **GHRHR** sur les somatotropes hypophysaires afin de stimuler la synthèse et la sécrétion de l’hormone de croissance (GH). Via la signalisation **cAMP/PKA**, la GHRH régule la libération pulsatile de GH et influence l’activité en aval de l’axe **IGF‑1**, reliant le contrôle neuroendocrinien à la croissance systémique, au métabolisme et à l’homéostasie tissulaire. La signalisation de la GHRH interagit avec des voies impliquées dans l’équilibre énergétique, la neurobiologie du sommeil et des rythmes circadiens, ainsi que la régulation endocrinienne en réponse au stress. La dérégulation de l’axe **GHRH–GHRHR–GH** est pertinente dans les troubles de la croissance et des phénotypes métaboliques, et constitue un point d’entrée mécanistique pour étudier les contributions neuroendocriniennes à la fonction hypophysaire et à la physiologie régulée par les hormones.
GHRH Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GHRH dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GHRH. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GHRH. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GHRH.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.