GHR CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-420549

Übersicht

Der Wachstumshormonrezeptor (GHR), kodiert durch das Mausgen *Ghr*, ist ein einfach membranspannender Zytokinrezeptor, der die Signalübertragung von Wachstumshormon vermittelt und damit somatisches Wachstum, den Stoffwechsel und die endokrine Homöostase reguliert. Die ligandeninduzierte Dimerisierung des Rezeptors aktiviert JAK2 und nachgeschaltete STAT5‑abhängige Transkriptionsprogramme; zusätzlich besteht Crosstalk mit den PI3K–AKT- und MAPK‑Signalwegen, die Proliferation, Nährstoffverwertung und Überleben beeinflussen. Die GHR‑abhängige Signalgebung steuert die hepatische IGF‑1‑Produktion und die systemische Insulinsensitivität und verknüpft so die Rezeptoraktivität mit Wachstums- und Stoffwechselphänotypen. Eine fehlregulierte Funktion der GH–GHR‑Achse ist relevant für die Forschung zu Wachstumsstörungen, Insulinresistenz und Gewebeumbau in endokrinen und entwicklungsbiologischen Kontexten.

Das GHR CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Ghr-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Ghr-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Ghr nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die GHR-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Ghr-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der GHR-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Ghr-Exone abzielen, die für die GHR-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Ghr-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom GHR CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom GHR CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Ghr-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das GHR HDR-Plasmid (m) und GHR HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Ghr-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Ghr-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.