Plasmide Double Nickase (h) GH-2: sc-401171-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GH-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GH-2 Double Nickase (h) et le plasmide GH-2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GH2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GH-2 | sc-401171-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GH-2 | sc-401171-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’hormone de croissance 2 (GH2) code la GH‑2, une variante placentaire de l’hormone de croissance qui active la signalisation via le récepteur de l’hormone de croissance et influe sur des processus systémiques liés à la croissance ainsi que sur l’homéostasie métabolique. L’activité de la GH‑2 est associée à la modulation des voies JAK2/STAT, MAPK/ERK et PI3K/AKT, intégrant des signaux endocriniens à des programmes transcriptionnels qui contrôlent l’utilisation des nutriments et la régulation de l’axe des facteurs de croissance de type insulinique (IGF). En biologie humaine, des modifications de la dynamique de l’hormone de croissance placentaire ont été associées à une dérégulation de la croissance materno‑fœtale et de l’adaptation métabolique, faisant de GH2 un locus pertinent pour des études mécanistiques de la signalisation endocrine. Comme GH2 présente des recouvrements de séquence et de fonction avec d’autres membres de la famille des hormones de croissance, il est également utile pour analyser la régulation spécifique des paralogues et l’engagement du récepteur dans des modèles cellulaires.
GH-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GH2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GH2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GH2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GH2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.