GDF-10 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406826

Panoramica

GDF10 codifica il fattore di differenziazione e crescita 10 (GDF-10), un ligando secreto appartenente alla superfamiglia del TGF-β, implicato nella regolazione della differenziazione cellulare, della formazione dei pattern tissutali e del rimodellamento della matrice extracellulare. GDF-10 segnala attraverso recettori chinasi della serina/treonina, attivando programmi trascrizionali canonici dipendenti da SMAD e intersecandosi con un più ampio crosstalk delle vie TGF-β/BMP che influenza le decisioni di destino cellulare e le risposte stromali. In letteratura, un’espressione alterata di GDF10 è stata associata a processi di sviluppo disregolati e a programmi di rimodellamento aberranti rilevanti per microambienti fibrotici e associati ai tumori. In vitro, GDF-10 viene spesso studiato per i suoi effetti sull’impegno di linea, sulla migrazione e sul controllo della crescita dipendente dal contesto in modelli cellulari umani.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO GDF-10 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene GDF10 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del GDF10 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto GDF10 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina GDF-10.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di GDF10 per lo studio della segnalazione di GDF-10, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni GDF10 critici per la funzione di GDF-10
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di GDF10 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal GDF-10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal GDF-10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus GDF10. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal GDF-10 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR GDF-10 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia GDF10 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio GDF10 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.