Plasmide Double Nickase (h) GCNT1: sc-410791-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GCNT1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GCNT1 Double Nickase (h) et le plasmide GCNT1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GCNT1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GCNT1 | sc-410791-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GCNT1 | sc-410791-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GCNT1 code une glycosyltransférase résidente de l’appareil de Golgi qui catalyse la formation du cœur 2 et de glycannes O ramifiés apparentés en transférant une N‑acétylglucosamine sur des structures Galβ1‑3GalNAc présentes sur les glycoprotéines. En remodelant la O‑glycosylation de type mucine, GCNT1 influence la liaison aux lectines, le trafic des récepteurs et les processus d’adhésion cellule–cellule qui façonnent les interactions des cellules immunitaires et les propriétés de la barrière épithéliale. Une activité altérée de GCNT1 peut modifier les motifs glycanes de surface cellulaire, affectant la présentation des ligands des sélectines et la signalisation inflammatoire en aval. Une ramification des O‑glycannes dérégulée associée à GCNT1 a été rapportée dans des contextes de dysfonction immunitaire et de transformation maligne, ce qui soutient son étude en glyco‑immunologie et en biologie des cellules cancéreuses.
GCNT1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GCNT1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GCNT1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GCNT1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GCNT1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.