Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO GCM2 (m): sc-430769
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- GCM2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique GCM2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GCM2 Antibody (C-5): sc-390603
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO GCM2 (m) | sc-430769 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Gcm2 code le facteur de transcription GCM2, membre de la famille « glial cells missing », qui se lie à l’ADN pour réguler des programmes d’expression génique spécifiques de lignée. Au cours du développement chez la souris, GCM2 est essentiel à la spécification et au maintien des glandes parathyroïdes, en coordonnant des réseaux transcriptionnels qui soutiennent l’homéostasie du calcium et du phosphate via la régulation de voies associées à l’hormone parathyroïdienne. La perturbation de Gcm2 altère la différenciation et l’identité des tissus endocriniens, ce qui en fait un nœud pertinent pour étudier le contrôle transcriptionnel de l’organogenèse. Une fonction GCM2 modifiée est associée à des anomalies du développement parathyroïdien et à des phénotypes de dérégulation du métabolisme minéral, soulignant sa pertinence dans des modèles explorant les mécanismes des maladies endocriniennes et métaboliques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO GCM2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Gcm2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Gcm2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Gcm2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine GCM2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Gcm2 pour l'étude de la signalisation de GCM2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Gcm2 essentiels à la fonction de GCM2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Gcm2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le GCM2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le GCM2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Gcm2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le GCM2 plasmide HDR (m) et le GCM2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Gcm2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Gcm2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.