GCH-I CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420509

개요

마우스 Gch1 유전자는 GTP로부터 테트라하이드로비옵테린(BH4)을 생합성하는 과정의 속도 결정 효소인 GTP 사이클로하이드롤레이스 I(GCH-I)을 암호화합니다. BH4는 카테콜아민과 세로토닌 생성에 관여하는 방향족 아미노산 하이드록실레이스와, 일산화질소(NO) 신호를 조절하는 일산화질소 합성효소(NOS)에 필수적인 산화환원 활성 보조인자입니다. GCH-I는 BH4의 가용성을 조절함으로써 프테리딘 대사를 신경전달물질 항상성, 혈관 생물학, 그리고 산화 스트레스 민감성과 연결합니다. GCH-I/BH4 축의 활성 변화는 신경계 및 심혈관 기능장애 모델에서 모노아민 경로의 조절 이상과 일산화질소 결합(coupling) 장애와 연관되어 왔습니다.

GCH-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Gch1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Gch1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Gch1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GCH-I 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GCH-I 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Gch1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GCH-I 기능에 중요한 Gch1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Gch1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GCH-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 GCH-I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Gch1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GCH-I HDR 플라스미드 (m) 및 GCH-I HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Gch1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Gch1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.