Plasmide Double Nickase (h) GCET2: sc-418185-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GCET2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GCET2 Double Nickase (h) et le plasmide GCET2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GCSAM. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GCET2 | sc-418185-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GCET2 | sc-418185-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GCSAM code pour GCET2, une protéine de type adaptateur principalement exprimée dans les lignées lymphoïdes, avec un enrichissement rapporté dans les cellules B issues du centre germinatif. GCET2 est impliquée dans des programmes de signalisation qui influencent l’état d’activation des cellules B, notamment des voies liées aux réponses dépendantes du récepteur de l’antigène, à l’adhésion cellulaire et au remodelage du cytosquelette, qui façonnent la migration et l’organisation de la synapse immunologique. Une expression altérée de GCET2 a été associée à des états de différenciation des cellules B et est fréquemment examinée comme caractéristique moléculaire dans des études sur la biologie des lymphomes et l’immunopathologie associée. Par conséquent, GCSAM/GCET2 est utilisé comme outil de recherche pour sonder des réseaux de signalisation et de transcription dépendants du contexte dans les cellules B normales et transformées.
GCET2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GCSAM dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GCSAM. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GCSAM. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GCSAM.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.