Plasmide Double Nickase (m) GBX2: sc-420503-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) GBX2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GBX2 Double Nickase (m) et le plasmide GBX2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Gbx2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) GBX2 | sc-420503-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) GBX2 | sc-420503-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Gbx2 code le facteur de transcription à homéoboîte GBX2, un régulateur se liant à l’ADN de manière spécifique à la séquence, qui organise l’embryon précoce et contribue à définir l’identité régionale au sein du tube neural et du rhombencéphale en développement. Chez la souris, l’activité de GBX2 s’intègre à des réseaux de signalisation du développement, notamment les voies WNT/β-caténine, FGF et de l’acide rétinoïque, afin de coordonner la spécification des progéniteurs, la segmentation et la différenciation neuronale. La perturbation de Gbx2 modifie les programmes transcriptionnels qui contrôlent les décisions de destinée cellulaire et la morphogenèse tissulaire, ce qui en fait un gène pertinent pour l’étude des phénotypes neurodéveloppementaux congénitaux et des réseaux de régulation génique. En tant que facteur de transcription nucléaire, GBX2 est également utilisé comme marqueur et comme nœud mécanistique pour analyser la progression des lignages et le contrôle spatio-temporel de l’expression génique au cours du développement.
GBX2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Gbx2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Gbx2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Gbx2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Gbx2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.