Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
GBP5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403674
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GBP5 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GBP5, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GBP5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403674 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
La proteína 5 de unión a guanilato (GBP5) es una GTPasa grande inducible por interferón que actúa como efector antimicrobiano e inmunorregulador en células inmunitarias innatas. Participa en programas de señalización del interferón y se ha relacionado con la regulación del inflamasoma, incluida la modulación de la producción de citocinas de la familia de la IL‑1 durante la detección de patógenos. GBP5 contribuye a las respuestas de defensa del huésped frente a microbios intracelulares y moldea redes de señalización inflamatoria que convergen con NF‑κB y con estados transcripcionales impulsados por citocinas. La expresión desregulada de GBP5 se ha asociado con patologías inflamatorias y firmas de enfermedad relacionadas con el sistema inmunitario, lo que la hace relevante para estudios de activación mieloide, biología de la infección e inmunometabolismo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GBP5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GBP5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GBP5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GBP5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GBP5.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GBP5 para la investigación de la señalización de GBP5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de GBP5 críticos para la función de GBP5
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GBP5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GBP5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GBP5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GBP5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GBP5 (h) y el plásmido HDR GBP5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GBP5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GBP5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.