Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) GBP2: sc-420501-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) GBP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GBP2 Double Nickase (m) et le plasmide GBP2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Gbp2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) GBP2 | sc-420501-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Gbp2** code la protéine de liaison au guanylate 2 (GBP2), une grande GTPase inductible par l’interféron qui participe à l’immunité intrinsèque des cellules. GBP2 est surexprimée en aval des voies de signalisation de l’interféron de type I et de type II via les voies JAK–STAT, et soutient la défense antimicrobienne en modulant des programmes de restriction des agents pathogènes, le trafic vésiculaire et des réponses associées à l’inflammasome. Dans les tissus immunitaires et les tissus barrières, GBP2 contribue à des réseaux de signalisation inflammatoire qui façonnent les interactions hôte–pathogène et peut influencer des phénotypes pertinents pour la maladie liés à des réponses à l’interféron dérégulées. Comme les membres de la famille GBP interfèrent avec la détection immunitaire innée et des programmes transcriptionnels pilotés par les cytokines, la perturbation de **Gbp2** est utile pour disséquer la fonction des gènes stimulés par l’interféron dans des modèles d’infection, d’inflammation et d’immunométabolisme.
GBP2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Gbp2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Gbp2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Gbp2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Gbp2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.