GBP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-402140

Übersicht

Guanylat-bindendes Protein 2 (GBP2) ist eine interferoninduzierbare, große GTPase, die an der zellintrinsischen Abwehr sowie an entzündungsassoziierten Signalprozessen beteiligt ist. GBP2 lokalisiert in zytosolischen und membranständigen Kompartimenten, wo es an Netzwerken interferonstimulierter Gene mitwirkt, pathogenrestriktive Prozesse reguliert und Signalwege der Immunantwort moduliert. Seine Aktivität verknüpft die Aktivierung der angeborenen Immunität mit nachgelagerten Effekten auf zelluläre Stressantworten, zytokingesteuerte Transkriptionsprogramme und den Umbau intrazellulärer Membranen. Eine dysregulierte GBP2-Expression und eine verstärkte Aktivierung von Interferon-Signalwegen wurden mit entzündlichen Zuständen und immunonkologischen Phänotypen in Verbindung gebracht, wodurch GBP2 einen nützlichen Ansatzpunkt für mechanistische Studien der Wirtsantwort und Immunregulation darstellt.

Das GBP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des GBP2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des GBP2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von GBP2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die GBP2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von GBP2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der GBP2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf GBP2-Exone abzielen, die für die GBP2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere GBP2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom GBP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom GBP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des GBP2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das GBP2 HDR-Plasmid (h) und GBP2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von GBP2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten GBP2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.