Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO GBP1 (h): sc-401778
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- GBP1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique GBP1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GBP1 Antibody (1B1): sc-53857
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO GBP1 (h) | sc-401778 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
La guanylate binding protein 1 (GBP1) est une grande GTPase de type dynamine, inductible par l’interféron, qui agit comme effecteur de l’immunité innée. Elle est fortement surexprimée en aval de la signalisation JAK/STAT en réponse aux interférons de type I et de type II, et participe à la défense cellulaire autonome en ciblant les compartiments contenant des agents pathogènes et en modulant des programmes antimicrobiens et inflammatoires. GBP1 a été associée à des processus tels que les réponses liées à l’inflammasome, le trafic intracellulaire et le remodelage du cytosquelette, avec des rôles dépendants du contexte dans la biologie de la barrière épithéliale et l’activation des cellules immunitaires. Une expression altérée de GBP1 est fréquemment observée dans des états inflammatoires chroniques, des modèles de maladies infectieuses et des microenvironnements immunitaires associés aux tumeurs, ce qui en fait un nœud utile pour l’étude des réseaux de gènes stimulés par l’interféron (ISG).
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO GBP1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène GBP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du GBP1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert GBP1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine GBP1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en GBP1 pour l'étude de la signalisation de GBP1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de GBP1 essentiels à la fonction de GBP1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de GBP1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le GBP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le GBP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus GBP1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le GBP1 plasmide HDR (h) et le GBP1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie GBP1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles GBP1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.