GATA-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420498
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GATA-6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GATA-6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GATA-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420498 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O Gata6 de camundongo codifica o fator de transcrição com dedo de zinco GATA-6, um regulador-chave da especificação da linhagem endodérmica e da diferenciação epitelial durante a embriogênese e a homeostase de tecidos adultos. O GATA-6 modula programas gênicos que controlam decisões de destino celular, morfogênese e desenvolvimento de órgãos, incluindo processos nos sistemas respiratório e gastrointestinal. Ele se integra a redes transcricionais do desenvolvimento e a vias de sinalização como WNT, BMP/TGF-β e FGF para coordenar respostas transcricionais dependentes do contexto. A atividade desregulada de GATA-6 tem sido associada a anomalias do desenvolvimento e a estados de diferenciação alterados, relevantes para a modelagem de defeitos congênitos e de mecanismos de remodelamento tecidual associado a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GATA-6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Gata6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Gata6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Gata6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GATA-6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Gata6 para a investigação da sinalização de GATA-6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Gata6 críticos para a função GATA-6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Gata6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GATA-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GATA-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Gata6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GATA-6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GATA-6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Gata6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Gata6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.