Plasmide Double Nickase (m) GATA-2: sc-420494-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) GATA-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GATA-2 Double Nickase (m) et le plasmide GATA-2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Gata2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GATA-2 Antibody (H-6): sc-515178
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) GATA-2 | sc-420494-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) GATA-2 | sc-420494-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Gata2** code le facteur de transcription à doigts de zinc **GATA-2**, un régulateur maître du maintien des cellules souches et progénitrices hématopoïétiques, de la spécification endothéliale et des premières étapes de la différenciation lympho-myéloïde. GATA-2 se fixe sur des motifs **WGATAR** pour coordonner des programmes transcriptionnels qui s’articulent avec des voies de signalisation de cytokines et de facteurs de croissance, notamment celles impliquant le facteur de cellules souches (**stem cell factor**)/**c-KIT**, **Notch** et des voies associées à **BMP/TGF-β**, modulant ainsi l’auto-renouvellement et l’engagement de lignée. Une activité de GATA-2 dérégulée perturbe l’homéostasie hématopoïétique et le développement vasculaire, faisant de **Gata2** un locus clé pour étudier, dans des modèles murins, les mécanismes à l’origine des phénotypes d’insuffisance médullaire, du remodelage transcriptionnel lié à la leucémogenèse et des réponses au stress inflammatoire.
GATA-2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Gata2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Gata2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Gata2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Gata2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.