Plasmide Double Nickase (h) gasdermin: sc-410658-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) gasdermin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide gasdermin Double Nickase (h) et le plasmide gasdermin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GSDMA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: gasdermin Antibody (H-6): sc-376318
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) gasdermin | sc-410658-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) gasdermin | sc-410658-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **GSDMA** code la gasdermine A, un membre de la famille des gasdermines impliqué dans l’homéostasie épithéliale et dans des voies de mort cellulaire régulée associées à la perméabilisation membranaire. Les gasdermines sont surtout connues comme effecteurs en aval de la signalisation liée aux inflammasomes et de la pyroptose, modulant la libération de cytokines et les réponses inflammatoires des barrières. L’expression de **GSDMA** est enrichie dans les épithéliums stratifiés et a été associée à des programmes génétiques et transcriptionnels pertinents pour l’asthme, des phénotypes cutanés inflammatoires et d’autres troubles à médiation immunitaire. En contexte de recherche, la perturbation de **GSDMA** permet des études mécanistiques des voies liées aux inflammasomes, de la différenciation épithéliale et de phénotypes de mort cellulaire déclenchée par le stress.
gasdermin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GSDMA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GSDMA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GSDMA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GSDMA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.