Plasmide Double Nickase (m) Gas6: sc-420490-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Gas6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Gas6 Double Nickase (m) et le plasmide Gas6 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Gas6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Gas6 | sc-420490-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Gas6 | sc-420490-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Growth arrest–specific 6 (Gas6) code un ligand sécrété dépendant de la vitamine K, qui se lie aux récepteurs tyrosine kinases de la famille TAM — en particulier AXL, MERTK et TYRO3 — afin de réguler la survie, la prolifération et la migration cellulaires. La signalisation Gas6–TAM coordonne l’efférocytose et atténue l’activation de l’immunité innée en modulant les voies associées à PI3K–AKT, MAPK/ERK et NF-κB, orientant ainsi les réponses des macrophages et des cellules dendritiques. Dans les tissus murins, Gas6 contribue à l’homéostasie vasculaire, à la fonction plaquettaire et à la réparation tissulaire en intégrant les signaux provenant des cellules apoptotiques et du remodelage de la matrice extracellulaire. L’activité dérégulée de l’axe Gas6/AXL est fréquemment étudiée dans l’inflammation, la fibrose et la biologie du microenvironnement tumoral, où elle influence l’immunosuppression, les programmes de transition épithélio-mésenchymateuse et les phénotypes métastatiques.
Gas6 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Gas6 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Gas6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Gas6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Gas6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.