GAS41 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-425664

概要

マウス Yeats4 は、YEATS ドメインを含むクロマチン関連因子である GAS41 をコードしており、ヒストンのアセチル化シグナルをクロマチンリモデリングへとつなぐことで転写調節に関与します。GAS41 はエピジェネティック制御複合体と会合すると報告されており、細胞周期進行、DNA 複製、ゲノム安定性に影響する RNA ポリメラーゼ II 依存的な遺伝子発現プログラムを支えます。クロマチン構造の制御と転写制御における役割を通じて、Yeats4/GAS41 は、増殖性組織におけるがん遺伝子性の転写状態、異数性、ストレス応答経路の研究に関連します。YEATS ファミリーのクロマチンリーダーの制御異常は、エンハンサー活性の変化や形質転換に関連する遺伝子発現と結び付けられており、そのため Yeats4 は、がんや発生生物学の機構研究に有用な結節点となります。

GAS41 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるYeats4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Yeats4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Yeats4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GAS41タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GAS41シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Yeats4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GAS41の機能に不可欠なYeats4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Yeats4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GAS41 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGAS41 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Yeats4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GAS41 HDRプラスミド（m）および GAS41 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはYeats4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のYeats4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。