Plásmido Doble Nickase (h) GABAC Rρ2: sc-404955-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GABAC Rρ2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GABAC Rρ2 (h) y el plásmido de doble nickasa GABAC Rρ2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GABRR2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GABAC Rρ2 | sc-404955-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GABAC Rρ2 | sc-404955-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRR2 codifica el receptor humano GABA\(_C\) rho2 (GABA\(_C\) Rρ2), un canal de cloruro activado por ligando de la familia de receptores Cys-loop que media la neurotransmisión inhibitoria. Tras la unión de GABA, los receptores que contienen rho2 conducen Cl⁻ para modular la excitabilidad de la membrana y la señalización sináptica, influyendo en la actividad de los circuitos y en el procesamiento de la información neuronal. La función de GABA\(_C\) Rρ2 se solapa con vías GABAérgicas más amplias que regulan el equilibrio excitación–inhibición y los estados de red dependientes de la actividad. La desregulación de la señalización inhibitoria y los patrones alterados de expresión de subunidades receptoras se estudian en el contexto de los mecanismos de enfermedades neurológicas y neuropsiquiátricas, lo que respalda la investigación en curso de GABRR2 en la función y la disfunción cerebral.
GABAC Rρ2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GABRR2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GABRR2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GABRR2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GABRR2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.