Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rγ1: sc-405161-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rγ1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GABAA Rγ1 Double Nickase (h) et le plasmide GABAA Rγ1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GABRG1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rγ1 | sc-405161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GABAA Rγ1 | sc-405161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRG1 code la sous-unité γ1 humaine du récepteur GABA\(_A\), un canal chlorure pentamérique activé par un ligand qui assure une neurotransmission inhibitrice rapide dans le système nerveux central. L’incorporation de sous-unités γ influence l’assemblage du récepteur, sa localisation synaptique, la cinétique d’ouverture/fermeture et ses propriétés pharmacologiques, façonnant ainsi l’excitabilité neuronale et les oscillations des réseaux. La signalisation via les récepteurs GABA\(_A\) s’articule avec des processus dépendants de l’activité, tels que la plasticité synaptique et l’équilibre excitation–inhibition, via l’homéostasie du chlorure et la modulation en aval du potentiel de membrane. Des altérations de la signalisation GABAergique ont été impliquées dans des phénotypes neuropsychiatriques et liés aux crises, ce qui fait de GABRG1 une cible pertinente pour des études mécanistiques de la fonction des circuits inhibiteurs.
GABAA Rγ1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GABRG1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GABRG1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GABRG1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GABRG1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.