G9a CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-430994

개요

마우스 Ehmt2는 히스톤 라이신 메틸전달효소 G9a를 암호화하며, 유크로마틴 전반에 걸쳐 억제성 크로마틴 상태를 형성하는 데 기여하는 H3K9 단일 및 이중 메틸화의 주요 ‘writer’입니다. G9a는 GLP(EHMT1) 및 이질염색질 연관 인자와 같은 크로마틴 조절자들과 협력하여, 배아 발생, 계통(라인리지) 결정, 세포 정체성 유지에 관여하는 전사적 침묵화 프로그램을 조율합니다. 크로마틴 접근성과 유전자 발현에 미치는 영향을 통해 EHMT2는 DNA 손상 반응, 복제 타이밍, 후성유전적 안정성에도 영향을 줍니다. G9a 활성과 H3K9me2 패턴의 이상은 종양 생물학, 신경발달 관련 표현형, 염증성 유전자 조절의 맥락에서 폭넓게 연구되고 있어, Ehmt2는 후성유전학 중심 연구에서 중요한 핵심 축으로 간주됩니다.

G9a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ehmt2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ehmt2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ehmt2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 G9a 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 G9a 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ehmt2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• G9a 기능에 중요한 Ehmt2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ehmt2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• G9a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 G9a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ehmt2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  G9a HDR 플라스미드 (m) 및 G9a HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ehmt2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ehmt2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.