Plasmide Double Nickase (h) FUNDC1: sc-403031-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FUNDC1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FUNDC1 Double Nickase (h) et le plasmide FUNDC1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FUNDC1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FUNDC1 | sc-403031-NIC | 20 µg | $410.00 |
FUNDC1 code un récepteur de la membrane mitochondriale externe qui favorise la mitophagie induite par l’hypoxie et le stress en se liant à LC3 via son motif LIR et en coordonnant l’élimination des mitochondries endommagées. Son activité est régulée par un contrôle dépendant de la phosphorylation de son affinité pour LC3 et s’inscrit à l’interface de la dynamique mitochondriale, de l’homéostasie bioénergétique et de la signalisation des espèces réactives de l’oxygène. Par ces mécanismes, FUNDC1 influence des programmes de survie cellulaire liés aux réponses au stress ischémique, aux défauts de contrôle qualité mitochondrial associés aux maladies neurodégénératives et à la dérégulation métabolique. Une altération de la fonction de FUNDC1 a été étudiée dans des contextes où une mitophagie perturbée contribue à l’inflammation et aux lésions tissulaires, ce qui en fait un point d’entrée utile pour explorer les voies de stress mitochondrial.
FUNDC1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FUNDC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FUNDC1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FUNDC1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FUNDC1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.