Plasmide Double Nickase (h) FucT-V: sc-408126-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FucT-V correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FucT-V Double Nickase (h) et le plasmide FucT-V Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FUT5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FucT-V | sc-408126-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FucT-V | sc-408126-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FUT5 code l’α1,3‑fucosyltransférase V (FucT‑V), une glycosyltransférase résidente de l’appareil de Golgi qui catalyse l’ajout terminal de fucose sur des substrats N‑acétyllactosamine afin de générer des glycannes fucosylés de type Lewis sur les glycoprotéines et les glycolipides. Cette activité soutient le flux biosynthétique des voies de fucosylation, qui influencent la reconnaissance cellule‑cellule, l’adhésion des leucocytes et le remodelage des glycannes des récepteurs à la surface cellulaire. Des modifications des profils de glycosylation dépendants de FUT5 ont été associées à des changements dans la présentation des ligands des sélectines ainsi qu’à une dérégulation plus large des signatures glycanes observée dans des états inflammatoires et dans de nombreux contextes cancéreux. En conséquence, FUT5 est fréquemment étudié dans la régulation de la maturation des glycoprotéines, du trafic membranaire des récepteurs glycosylés et des interactions glyco‑immunitaires.
FucT-V Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FUT5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FUT5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FUT5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FUT5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.