Plasmide Double Nickase (h) FucT-IX: sc-416354-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FucT-IX correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FucT-IX Double Nickase (h) et le plasmide FucT-IX Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FUT9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FucT-IX | sc-416354-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FucT-IX | sc-416354-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FUT9 code l’α1,3‑fucosyltransférase humaine FucT‑IX, une enzyme résidente de l’appareil de Golgi qui catalyse le transfert de fucose sur des accepteurs N‑acétyllactosamine afin de générer des glycannes fucosylés de type Lewis. En régulant la fucosylation terminale, FUT9 influence des processus dépendants de la glycosylation, notamment la reconnaissance cellule–cellule, la fonction des molécules d’adhérence et la modulation des structures glycanes des récepteurs et des glycolipides. L’activité de FUT9 contribue à la biosynthèse d’épitopes apparentés au Lewis X, ce qui la relie à des voies qui façonnent les interactions immunitaires et la signalisation cellulaire au cours du développement. Des profils de fucosylation dérégulés impliquant FUT9 ont été étudiés dans des contextes tels que le remodelage des glycannes associé à l’inflammation et les signatures de glycosylation altérées observées en cancérologie.
FucT-IX Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FUT9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FUT9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FUT9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FUT9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.