Plasmide Double Nickase (h) FSHR: sc-400899-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FSHR correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FSHR Double Nickase (h) et le plasmide FSHR Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FSHR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FSHR | sc-400899-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FSHR | sc-400899-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le récepteur de l’hormone folliculo‑stimulante (FSHR) est un récepteur couplé aux protéines G, exprimé principalement dans les cellules somatiques des gonades. La liaison de l’hormone folliculo‑stimulante active la signalisation Gαs/adénylate cyclase, ce qui augmente l’AMPc et déclenche des programmes transcriptionnels dépendants de la PKA. Les effets en aval comprennent la modulation de la stéroïdogenèse, de la prolifération, de la différenciation et de la survie cellulaires via une signalisation coordonnée avec les voies MAPK/ERK et PI3K/AKT. En biologie humaine, la fonction de FSHR est centrale dans la régulation de la folliculogenèse et de la spermatogenèse, reliant l’activité du récepteur à l’endocrinologie de la reproduction et à des états cellulaires sensibles aux hormones. Des altérations de l’expression ou de la signalisation de FSHR ont été étudiées dans le contexte de phénotypes d’infertilité, de dysfonctionnement ovarien et de dérégulations des voies endocriniennes pertinentes pour la recherche sur le système reproducteur.
FSHR Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FSHR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FSHR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FSHR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FSHR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.