FRRS1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422860

Descripción general

Frrs1 codifica FRRS1, una proteína asociada al retículo endoplásmico implicada en la maduración y la regulación funcional de los receptores de glutamato tipo AMPA. En neuronas, FRRS1 participa en el desarrollo de las sinapsis glutamatérgicas y en la neurotransmisión excitatoria al apoyar el ensamblaje y el tráfico de los receptores, así como su disponibilidad sináptica. La alteración de los procesos vinculados a FRRS1 puede modificar la homeostasis de la señalización sináptica y la actividad de las redes neuronales, lo que convierte a Frrs1 en una diana relevante para estudiar los mecanismos subyacentes a fenotipos del neurodesarrollo y neurológicos. Por ello, los modelos murinos de Frrs1 son útiles para desentrañar vías de biogénesis de receptores y programas celulares relacionados con la plasticidad sináptica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FRRS1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Frrs1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Frrs1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Frrs1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FRRS1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Frrs1 para la investigación de la señalización de FRRS1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Frrs1 críticos para la función de FRRS1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Frrs1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FRRS1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido FRRS1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Frrs1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FRRS1 (m) y el plásmido HDR FRRS1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Frrs1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Frrs1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.