Plasmide Double Nickase (h) Fra2: sc-400250-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Fra2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Fra2 Double Nickase (h) et le plasmide Fra2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FOSL2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Fra2 Antibody (G-5): sc-166102
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Fra2 | sc-400250-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Fra2 | sc-400250-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **FOSL2** code **Fra2**, un facteur de transcription bZIP de la famille **AP‑1** qui forme des hétérodimères avec les protéines **JUN** afin de réguler l’expression génique en réponse à des stimuli. Fra2 intègre les signalisations **MAPK/ERK** et **JNK** pour contrôler la prolifération, la différenciation, le remodelage de la matrice extracellulaire et des programmes transcriptionnels inflammatoires. Via une régulation dépendante d’AP‑1 de cytokines, de métalloprotéinases et de gènes associés à la **TEM/EMT** (transition épithélio‑mésenchymateuse), une activité altérée de FOSL2 a été associée à des signalisations oncogéniques, à des voies liées à la fibrose et à une dérégulation immunitaire dans de multiples contextes tissulaires. Fra2 est donc largement utilisé comme nœud moléculaire pour étudier le remodelage des réseaux transcriptionnels en aval des facteurs de croissance, des signaux de stress et des signaux développementaux.
Fra2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FOSL2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FOSL2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FOSL2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FOSL2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.