Fra1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400527-LAC

FOSL1 kodiert Fra1 (Fos-like antigen 1), einen basischen Leucin-Zipper-Transkriptionsfaktor, der mit JUN-Proteinen Heterodimere bildet, um den AP-1-Komplex zu formen und stimulusabhängige Genexpressionsprogramme zu regulieren. Fra1 integriert Signale aus MAPK/ERK-, JNK- und weiteren stressresponsiven Signalwegen, um Zellzyklusprogression, Differenzierung, Migration und Umbau der extrazellulären Matrix zu modulieren. Eine Fehlregulation der FOSL1-Aktivität wurde in verschiedenen Gewebekontexten mit onkogenen transkriptionellen Netzwerken, epithelial-mesenchymalen-Transition(EMT)-ähnlichen Phänotypen und veränderter inflammatorischer Signalgebung in Verbindung gebracht. Als transkriptioneller Regulator wird Fra1 häufig als Knotenpunkt genutzt, um enhancergetriebene Genregulation und das Zusammenspiel von Signalwegen nach Wachstumsfaktor- und Zytokinsignalen zu untersuchen.

Fra1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente FOSL1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Fra1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der FOSL1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Fra1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen FOSL1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.