Plasmide Double Nickase (h) FOXF2: sc-404367-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FOXF2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FOXF2 Double Nickase (h) et le plasmide FOXF2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FOXF2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FOXF2 Antibody (L-29): sc-101043
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FOXF2 | sc-404367-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FOXF2 | sc-404367-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXF2 (forkhead box F2) code un facteur de transcription de la famille Forkhead qui régule les programmes de différenciation mésenchymateuse et la signalisation épithélio-mésenchymateuse au cours du développement des tissus et de leur homéostasie. FOXF2 module des réseaux géniques liés à l’organisation de la matrice extracellulaire, à la migration cellulaire et au remodelage angiogénique, avec des interactions fonctionnelles avec des voies telles que TGF-β/SMAD et Wnt/β-caténine qui façonnent les phénotypes stromaux et vasculaires. Une expression ou une activité régulatrice altérée de FOXF2 a été associée à une perturbation de la mise en place des patrons développementaux et à des rôles dépendants du contexte en biologie tumorale, notamment via des effets sur l’invasion, le stroma associé aux métastases et le microenvironnement vasculaire. En tant que protéine nucléaire se liant à l’ADN, FOXF2 est fréquemment étudiée pour cartographier les circuits transcriptionnels spécifiques de lignée et pour disséquer les interactions gènes–environnement qui influencent l’architecture tissulaire.
FOXF2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FOXF2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FOXF2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FOXF2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FOXF2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.