Plasmide Double Nickase (h) FOXD2: sc-410785-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FOXD2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FOXD2 Double Nickase (h) et le plasmide FOXD2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FOXD2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FOXD2 | sc-410785-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FOXD2 | sc-410785-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXD2 code un facteur de transcription de la famille forkhead box (FOX) qui se lie à l’ADN via un domaine forkhead/hélice ailée conservé afin de réguler des programmes d’expression génique spécifiques de certains types cellulaires. FOXD2 est impliqué dans des réseaux transcriptionnels associés au développement et à la différenciation, en coordonnant les choix de lignée et le maintien de l’identité cellulaire grâce à la modulation de l’activité des promoteurs et des enhancers. En tant que régulateur transcriptionnel, une activité altérée de FOXD2 peut perturber des voies en aval contrôlant la prolifération, l’apoptose et la morphogenèse, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la dérégulation de l’expression génique dans des contextes pathologiques. Sa fonction nucléaire et sa portée régulatrice sur de multiples loci cibles justifient l’exploration des réseaux géniques dépendants de FOXD2, des transitions d’état de la chromatine et du contrôle transcriptionnel spécifique au contexte.
FOXD2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FOXD2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FOXD2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FOXD2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FOXD2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.