Plasmide Double Nickase (h) FOXD1: sc-402521-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FOXD1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FOXD1 Double Nickase (h) et le plasmide FOXD1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FOXD1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FOXD1 Antibody (2C10): sc-293238
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FOXD1 | sc-402521-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FOXD1 | sc-402521-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXD1 code un facteur de transcription de la famille forkhead box qui régule, selon le contexte, des programmes d’expression génique contrôlant la spécification du destin cellulaire, la différenciation et la mise en place des tissus. Au cours du développement humain, FOXD1 est particulièrement associé aux lignages mésenchymateux et à la morphogenèse rénale, en influençant des réseaux transcriptionnels qui coordonnent la signalisation stroma–épithélium, l’organisation de la matrice extracellulaire et l’organogenèse. Une expression dérégulée de FOXD1 a été associée à des altérations de l’engagement de lignée et à des voies de remodelage qui recoupent le contrôle du cycle cellulaire et des cascades de signalisation développementales. En tant que protéine nucléaire se liant à l’ADN, FOXD1 constitue un nœud utile pour analyser la régulation transcriptionnelle, l’activité des enhancers et les interactions entre voies de développement dans des modèles cellulaires pertinents pour les maladies.
FOXD1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FOXD1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FOXD1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FOXD1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FOXD1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.