Plasmide Double Nickase (h) FN3KRP: sc-413205-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FN3KRP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FN3KRP Double Nickase (h) et le plasmide FN3KRP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FN3KRP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FN3KRP Antibody (G-1): sc-376717
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FN3KRP | sc-413205-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FN3KRP | sc-413205-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FN3KRP (protéine apparentée à la fructosamine-3-kinase) est un membre de la famille FN3K, impliquée dans la déglycation des protéines et les défenses cellulaires contre la glycation non enzymatique. En modulant le renouvellement des adduits fructosamine/Amadori sur les protéines, FN3KRP est liée à la protéostasie, à l’équilibre rédox et aux réponses au stress métabolique pertinentes pour l’homéostasie du glucose. Une activité altérée des voies glycation–déglycation peut influencer l’accumulation de produits terminaux de glycation avancée (AGE) et la signalisation en aval associée au stress oxydatif et à l’inflammation. Par conséquent, FN3KRP est étudiée dans le contexte de la dérégulation métabolique et des phénotypes cellulaires associés à la glycation dans les cellules humaines.
FN3KRP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FN3KRP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FN3KRP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FN3KRP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FN3KRP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.