Plasmide Double Nickase (h) FMNL1: sc-404817-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FMNL1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FMNL1 Double Nickase (h) et le plasmide FMNL1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FMNL1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FMNL1 Antibody (C-5): sc-390023
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FMNL1 | sc-404817-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FMNL1 | sc-404817-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La protéine de type formin 1 (FMNL1) est un facteur de nucléation et d’élongation de l’actine, appartenant à la famille des formines apparentées à Diaphanous, qui favorise l’assemblage et le remodelage des filaments via ses domaines FH1/FH2. Elle est fortement exprimée dans les lignées hématopoïétiques et soutient des processus du cytosquelette tels que la polarisation cellulaire, l’adhésion et la migration dirigée, en reliant la signalisation des GTPases de la famille Rho à l’organisation dynamique de l’actine. La fonction de FMNL1 contribue au trafic des cellules immunitaires ainsi qu’aux interactions phagocytaires ou de type synapse, en coordonnant les structures protrusives et les réseaux d’actine associés à la membrane. Une expression ou une signalisation dérégulée de FMNL1 a été associée à des modifications du comportement des leucocytes et a été rapportée dans de multiples contextes de tumeurs hématologiques et solides, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques sur l’invasion, la régulation immunitaire et les phénotypes dépendants du cytosquelette.
FMNL1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FMNL1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FMNL1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FMNL1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FMNL1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.