Plasmide Double Nickase (h) fibrillin-1: sc-401449-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) fibrillin-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide fibrillin-1 Double Nickase (h) et le plasmide fibrillin-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FBN1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) fibrillin-1 | sc-401449-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) fibrillin-1 | sc-401449-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FBN1 code la fibrilline‑1, un composant structural majeur des microfibrilles extracellulaires, qui sert d’échafaudage à l’assemblage des fibres élastiques et contribue à déterminer la biomécanique des tissus conjonctifs. Au‑delà de son rôle de soutien architectural, la fibrilline‑1 régule la signalisation de la matrice extracellulaire en séquestrant et en présentant des ligands latents de la famille du TGF‑β, reliant ainsi l’intégrité des microfibrilles à des programmes transcriptionnels dépendants de SMAD et à la communication cellule–matrice. La perturbation des réseaux de microfibrilles associés à FBN1 est étroitement liée à une dérégulation de la signalisation TGF‑β et à une mécanotransduction altérée dans les tissus vasculaires, squelettiques et oculaires. En conséquence, FBN1 est largement étudié dans les voies qui gouvernent l’homéostasie de la matrice extracellulaire, la maturation des fibres élastiques et les mécanismes des maladies du tissu conjonctif.
fibrillin-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FBN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FBN1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FBN1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FBN1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.