Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FHOD1 Double Nickase Plasmid (h): sc-404286-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das FHOD1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- FHOD1 Double-Nickase-Plasmid (h) und FHOD1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf FHOD1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: FHOD1: sc-365437
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
FHOD1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-404286-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FHOD1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-404286-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FHOD1 (Formin-Homologie-2-Domäne enthaltend 1) kodiert ein Diaphanous-verwandtes Formin, das die Verlängerung und Organisation von Aktinfilamenten fördert und dadurch die Bildung von Stressfasern, die Zellpolarität sowie adhäsionsabhängige Migration unterstützt. Als Effektor nachgeschaltet der Signalwege von Rho-Familien-GTPasen integriert FHOD1 Signale aus zytoskelettalen Umbauprozessen, um Kontraktilität und die Dynamik von Membranprotrusionen zu regulieren. Eine veränderte FHOD1-Aktivität wurde mit Änderungen der Zellmotilität und des invasiven Verhaltens in Verbindung gebracht; zudem legt eine Fehlregulation der Aktinarchitektur eine Beteiligung von FHOD1 in Studien zur Tumorprogression, zum kardiovaskulären und fibrotischen Remodeling sowie zu neuroentwicklungsbezogenen Prozessen nahe. Seine Lokalisation und Funktion an aktinreichen Strukturen machen FHOD1 zu einem nützlichen Ansatzpunkt, um Mechanotransduktion und die Kopplung zwischen Zytoskelett und Zellkern zu untersuchen.
FHOD1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des FHOD1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von FHOD1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die FHOD1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit FHOD1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.