Plasmide Double Nickase (h) FGF-5: sc-401993-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FGF-5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FGF-5 Double Nickase (h) et le plasmide FGF-5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FGF5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FGF-5 Antibody (F-11): sc-376264
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FGF-5 | sc-401993-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FGF-5 | sc-401993-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FGF5 code le facteur de croissance des fibroblastes 5 (FGF‑5), un ligand sécrété qui transmet son signal principalement via FGFR1/FGFR2, avec le sulfate d’héparane comme cofacteur, afin d’activer les voies MAPK/ERK, PI3K–AKT et PLCγ. Il participe à la régulation de la prolifération, de la différenciation et de la survie cellulaires, ainsi qu’au remodelage de la matrice extracellulaire, au cours du développement et dans l’homéostasie tissulaire. En biologie de la peau et du follicule pileux, FGF‑5 est un régulateur clé de la transition de l’anagène vers le catagène, ce qui le relie aux phénotypes de croissance des cheveux. Une dérégulation de la signalisation FGF‑5/FGFR a été associée à des altérations des réseaux de facteurs de croissance en oncologie, ainsi qu’à des contextes de réparation anormale des plaies et de remodelage fibrotique aberrant.
FGF-5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FGF5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FGF5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FGF5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FGF5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.