Plasmide Double Nickase (h) FGF-2: sc-400324-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FGF-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FGF-2 Double Nickase (h) et le plasmide FGF-2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FGF2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FGF-2 Antibody (G-2): sc-365106
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FGF-2 | sc-400324-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FGF-2 | sc-400324-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FGF2 code le facteur de croissance des fibroblastes 2 (FGF-2), un facteur de croissance multifonctionnel se liant à l’héparine, qui transmet des signaux via les récepteurs FGFR afin de réguler la prolifération, la survie, la migration et la différenciation dans les lignages mésenchymateux et neuronaux. FGF-2 est un médiateur central de l’angiogenèse et du remodelage tissulaire, coordonnant les interactions avec la matrice extracellulaire et la signalisation paracrine au sein du microenvironnement stromal. En aval, il active les voies canoniques MAPK/ERK et PI3K/AKT, avec des liens supplémentaires vers la signalisation PLCγ et STAT, qui modulent la progression du cycle cellulaire et les réponses au stress. Une activité dérégulée de FGF2 et une altération de la signalisation via les FGFR sont associées à la progression tumorale et à la néovascularisation, ainsi qu’à des processus de remodelage fibrotique et inflammatoire, ce qui en fait une cible fréquente dans les études mécanistiques de la signalisation des facteurs de croissance.
FGF-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FGF2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FGF2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FGF2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FGF2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.