Ferroportin-1 Double Nickaseプラスミド (m): sc-424774-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Ferroportin-1 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Ferroportin-1ダブルニカースプラスミド（m）およびFerroportin-1ダブルニカースプラスミド（m2）は、Slc40a1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Ferroportin-1 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-424774-NIC | 20 µg | $410.00 |
Slc40a1 はフェロポルチン1（ferroportin-1）をコードしており、フェロポルチン1は主要な細胞性鉄排出トランスポーターとして、腸管上皮細胞、マクロファージ、肝細胞、胎盤細胞からの Fe²⁺排出を介して、全身および組織における鉄の分配を制御する。フェロポルチンの活性はヘプシジン–フェロポルチン軸によって厳密に調節され、ヘプシジンが結合するとフェロポルチンの内在化と分解が誘導されることで、鉄フラックスが炎症や代謝のシグナルと連動する。鉄の利用可能性に影響を与えることを通じて、フェロポルチン1は赤血球産生、ミトコンドリア機能、酸化ストレス応答、ならびにマクロファージによる鉄のリサイクルに関与する。Slc40a1 依存的な鉄ハンドリングの破綻は、鉄過剰状態および鉄制限状態のいずれにも関係し、炎症に伴う貧血、肝臓の鉄代謝、感染生物学、神経炎症などの研究でしばしばモデル化されている。
Ferroportin-1 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Slc40a1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Slc40a1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Slc40a1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Slc40a1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。