Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Fe65 (h): sc-403226
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Fe65 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Fe65, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Fe65 Antibody (F-6): sc-398389
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Fe65 (h) | sc-403226 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
APBB1 code la protéine adaptatrice Fe65, un partenaire de la protéine précurseur de l’amyloïde (APP) enrichi dans les neurones, qui couple le trafic membranaire à la signalisation nucléaire. Fe65 participe au traitement d’APP et aux voies endocytiques via la liaison, par son domaine PTB, à APP et à des récepteurs apparentés, et elle assemble des complexes multiprotéiques avec des facteurs tels que l’AICD et des régulateurs transcriptionnels afin d’influencer l’expression génique. Par ces interactions, Fe65 relie la fonction synaptique, la dynamique du cytosquelette et la protéolyse régulée, des processus fréquemment étudiés dans la recherche sur les neurodégénérescences. Des altérations de la signalisation APP–Fe65 et des programmes transcriptionnels en aval ont été examinées dans le contexte de mécanismes liés à la maladie d’Alzheimer ainsi que de réponses plus générales au stress neuronal.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Fe65 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène APBB1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du APBB1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert APBB1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Fe65.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en APBB1 pour l'étude de la signalisation de Fe65, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de APBB1 essentiels à la fonction de Fe65
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de APBB1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Fe65 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Fe65 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus APBB1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Fe65 plasmide HDR (h) et le Fe65 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie APBB1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles APBB1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.