FBXO38 Plasmide Double Nickase (m): sc-430688-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FBXO38 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FBXO38 Double Nickase Plasmid (m) e il FBXO38 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Fbxo38. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FBXO38 Plasmide Double Nickase (m) | sc-430688-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FBXO38 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-430688-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Fbxo38 codifica FBXO38, una proteina F-box che si prevede funzioni come componente di riconoscimento del substrato nei complessi E3 ubiquitina ligasi SCF (SKP1–CUL1–F-box), collegando proteine selezionate all’ubiquitinazione e alla successiva degradazione mediata dal proteasoma. Attraverso questo ruolo, FBXO38 è in grado di influenzare la proteostasi cellulare, il controllo del ciclo cellulare e le vie di trasduzione del segnale che dipendono dalla stabilità proteica regolata. Alterazioni della segnalazione ubiquitinica mediata da proteine F-box sono ampiamente associate a proliferazione disregolata, risposte allo stress e mantenimento del genoma, rendendo Fbxo38 un bersaglio utile per studi meccanicistici in sistemi murini. L’analisi delle reti di ubiquitinazione dipendenti da FBXO38 può aiutare a chiarire come la degradazione mirata moduli l’omeostasi tissutale e fenotipi cellulari rilevanti per la malattia.
FBXO38 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Fbxo38 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Fbxo38. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Fbxo38. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Fbxo38 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.