Plasmide Double Nickase (m) FBXO38: sc-430688-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) FBXO38 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FBXO38 Double Nickase (m) et le plasmide FBXO38 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Fbxo38. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) FBXO38 | sc-430688-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) FBXO38 | sc-430688-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Fbxo38* code la protéine FBXO38, une protéine à domaine F-box dont on prédit qu’elle agit comme composant de reconnaissance des substrats au sein des complexes ligases E3 ubiquitine de type SCF (SKP1–CUL1–F-box), reliant des protéines sélectionnées à l’ubiquitination et à leur dégradation par le protéasome. Par ce rôle, FBXO38 est susceptible d’influencer la protéostasie cellulaire, le contrôle du cycle cellulaire et les voies de transduction du signal qui dépendent d’une stabilité protéique finement régulée. Une altération de la signalisation ubiquitine médiée par les protéines F-box est largement associée à une prolifération dérégulée, à des réponses au stress anormales et à la maintenance du génome, ce qui fait de *Fbxo38* une cible utile pour des études mécanistiques dans des systèmes murins. L’étude des réseaux d’ubiquitination dépendants de FBXO38 peut aider à préciser comment la dégradation ciblée module l’homéostasie tissulaire et des phénotypes cellulaires liés aux maladies.
FBXO38 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Fbxo38 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Fbxo38. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Fbxo38. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Fbxo38.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.