FAM98A Plasmide Double Nickase (h): sc-411841-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FAM98A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FAM98A Double Nickase Plasmid (h) e il FAM98A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FAM98A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FAM98A Plasmide Double Nickase (h) | sc-411841-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FAM98A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411841-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FAM98A codifica una proteina conservata legante l’RNA, implicata nella biologia dei complessi ribonucleoproteici e nel coordinamento dell’elaborazione dell’RNA con l’omeostasi proteica. È stata associata alla regolazione della traduzione e del traffico intracellulare di assemblaggi RNA–proteina, ed è spesso studiata nel contesto delle risposte cellulari allo stress e del controllo della crescita. Un’alterata espressione di FAM98A è stata riportata in molteplici dataset trascrittomici associati a patologie, a supporto dell’indagine sul suo contributo alla proliferazione deregolata e alla proteostasi nelle cellule umane. La caratterizzazione funzionale di FAM98A è quindi rilevante per vie che governano il metabolismo dell’RNA, la progressione del ciclo cellulare e la segnalazione adattativa allo stress.
FAM98A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FAM98A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FAM98A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FAM98A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FAM98A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.