FAM86A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427731
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- FAM86A El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico FAM86A, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
FAM86A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-427731 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Eef2kmt codifica FAM86A, una metiltransferasa de proteínas de la que se ha informado que modifica el factor de traducción eEF2, lo que la vincula al control postraduccional de la función del ribosoma y de la elongación de la traducción. Al regular la homeostasis de proteínas asociadas a eEF2, FAM86A está en posición de influir en programas de crecimiento celular, respuestas al estrés y la adaptación a cambios en el estado de nutrientes y energía. La alteración de las redes de control de la traducción es ampliamente relevante para fenotipos proliferativos y neurobiológicos, lo que convierte a Eef2kmt en una diana útil para estudios mecanísticos de proteostasis y de la interrelación entre vías de señalización en sistemas murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO FAM86A (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Eef2kmt en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Eef2kmt junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Eef2kmt tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FAM86A.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Eef2kmt para la investigación de la señalización de FAM86A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Eef2kmt críticos para la función de FAM86A
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Eef2kmt para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido FAM86A CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido FAM86A CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Eef2kmt. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FAM86A (m) y el plásmido HDR FAM86A (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Eef2kmt para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Eef2kmt definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.