Plasmide Double Nickase (h) FAM46A: sc-410014-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FAM46A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FAM46A Double Nickase (h) et le plasmide FAM46A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FAM46A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FAM46A | sc-410014-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FAM46A | sc-410014-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FAM46A (famille présentant une similarité de séquence 46, membre A, également connu sous le nom de TENT5A) code une poly(A) polymérase non canonique impliquée dans l’ajout de queues poly(A) aux ARNm dans le cytoplasme, influençant la stabilité des transcrits et l’efficacité de la traduction. Cette protéine est associée à des programmes de régulation génique post‑transcriptionnelle qui façonnent les transitions d’état cellulaire, notamment les changements liés à la différenciation dans l’expression des gènes de la sécrétion et de la matrice extracellulaire. Des perturbations de FAM46A ont été associées à une dérégulation du métabolisme de l’ARN et à une altération de la protéostasie, et des modifications génétiques ou d’expression ont été rapportées dans des contextes de maladies hématologiques telles que le myélome multiple. En conséquence, FAM46A est fréquemment étudié pour sa contribution aux voies de maturation/traitement de l’ARN et à leurs effets en aval sur le phénotype cellulaire.
FAM46A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FAM46A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FAM46A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FAM46A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FAM46A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.