Plasmide CRISPR/Cas9 KO FAM208A (h): sc-405884

Présentation

FAM208A code une protéine nucléaire qui participe à des processus associés à la chromatine, influençant la régulation transcriptionnelle et le maintien du génome. Elle a été impliquée dans les voies de réponse aux dommages de l’ADN et dans le contrôle épigénétique via des interactions avec des complexes nucléaires multiprotéiques, contribuant à une progression correcte du cycle cellulaire et à l’adaptation au stress. Une régulation altérée de l’organisation de la chromatine et de la fidélité des mécanismes de réparation impliquant FAM208A peut contribuer aux phénotypes d’instabilité génomique observés dans les cancers et d’autres troubles prolifératifs. Sa localisation majoritairement nucléaire en fait une cible utile pour disséquer les mécanismes qui couplent l’état de la chromatine à l’expression génique et aux issues de la réparation de l’ADN dans les cellules humaines.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO FAM208A (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène FAM208A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du FAM208A, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert FAM208A à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine FAM208A.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en FAM208A pour l'étude de la signalisation de FAM208A, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de FAM208A essentiels à la fonction de FAM208A
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de FAM208A pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le FAM208A plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le FAM208A plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus FAM208A. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le FAM208A plasmide HDR (h) et le FAM208A (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie FAM208A pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles FAM208A définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.