FAM188B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-413571

概要

FAM188Bは、ユビキチン依存的な分解やプロテオスタシス（タンパク質恒常性）ネットワークとの推定上の関連を通じて、タンパク質恒常性の維持とシグナル伝達の制御に関与すると考えられているものの、十分に特徴付けられていないヒトタンパク質をコードします。近年の知見から、FAM188Bは細胞増殖およびストレス適応応答と関連することが示されており、細胞周期の進行、生存シグナル、ならびにタンパク質毒性条件への適応を協調的に制御する経路との関わりが示唆されています。複数の腫瘍タイプで発現パターンの変化が報告されていることから、FAM188Bを腫瘍性表現型の調節因子および状況依存的な脆弱性に関わる因子として検討する意義が支持されます。機構的な定義はなお限定的であるものの、FAM188Bは、プロテオーム制御が増殖制御や細胞の健全性（フィットネス）とどのように接続しているかを解明するための有用な標的です。

FAM188B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFAM188B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FAM188B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FAM188Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FAM188Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FAM188Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FAM188B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FAM188Bの機能に不可欠なFAM188Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FAM188Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FAM188B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFAM188B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FAM188B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FAM188B HDRプラスミド（h）および FAM188B HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFAM188Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFAM188B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。