FAM122A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405370

概要

FAM122Aは、タンパク質ホスファターゼ活性およびリン酸化依存性シグナル伝達の制御に関与するとされる、小型で進化的に保存されたタンパク質をコードしています。近年の知見により、FAM122Aがセリン／スレオニンホスファターゼ複合体の調節に関与し、可逆的リン酸化に依存する細胞周期の進行、ストレス応答、転写プログラムに影響を与える可能性が示されています。ホスファターゼのバランスが変化すると、増殖、アポトーシス、分化を制御する経路が再編され得るため、FAM122Aはシグナルネットワークのロバスト性を研究する上で有用な結節点となります。FAM122Aが関わるリン酸化回路の破綻は、がん原性シグナルや細胞の適応度に関連する状況で報告されており、疾患関連のトランスクリプトーム／プロテオームデータセットにおける検討対象としての有用性が支持されています。

FAM122A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFAM122A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FAM122A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FAM122Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FAM122Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FAM122Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FAM122A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FAM122Aの機能に不可欠なFAM122Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FAM122Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FAM122A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFAM122A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FAM122A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FAM122A HDRプラスミド（h）および FAM122A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFAM122Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFAM122A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。