Plasmide CRISPR/Cas9 KO FAF1 (m): sc-420281
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- FAF1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique FAF1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FAF1 Antibody (E-4): sc-393965
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO FAF1 (m) | sc-420281 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le facteur associé à Fas 1 (FAF1), codé par le gène murin *Faf1*, est un adaptateur multifonctionnel impliqué dans la régulation de l’apoptose et du contrôle qualité des protéines. FAF1 participe aux complexes de signalisation associés aux récepteurs de mort et module les voies dépendantes des caspases, tout en interagissant avec des composants du système ubiquitine–protéasome afin d’influencer l’ubiquitination et le renouvellement des protéines de signalisation. Par ces activités, FAF1 fait le lien entre les réponses au stress et les décisions de destinée cellulaire, et contribue au maintien de l’homéostasie cellulaire. Une expression ou une fonction dérégulée de FAF1 a été associée à une sensibilité apoptotique altérée et a été étudiée dans des contextes tels que la neurodégénérescence, la régulation immunitaire et la signalisation liée au cancer.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO FAF1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Faf1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Faf1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Faf1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine FAF1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Faf1 pour l'étude de la signalisation de FAF1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Faf1 essentiels à la fonction de FAF1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Faf1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le FAF1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le FAF1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Faf1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le FAF1 plasmide HDR (m) et le FAF1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Faf1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Faf1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.