Evi-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404112

개요

MECOM은 전사인자 Evi-1을 암호화하며, Evi-1은 유전자 발현 프로그램을 조절하는 아연 손가락(zinc finger) DNA 결합 단백질로서 조혈 줄기세포 및 전구세포의 유지, 계통 결정(lineage commitment), 그리고 세포 분화를 통제합니다. Evi-1은 TGF-β/SMAD 신호전달, PI3K–AKT 경로, 염색질 리모델링과 교차하는 전사 및 후성유전 네트워크에 관여하여 증식과 생존을 조절합니다. MECOM/Evi-1의 조절 이상은 혈액암에서 흔히 관찰되며, 변화된 전사 조절이 비정상적인 자가재생과 분화 장애에 기여합니다. 혈액 발달 외에도 MECOM은 다양한 조직 맥락에서 형질전환 및 전이성 표현형과 관련된 발달 과정과 종양성 전사 회로에도 관여하는 것으로 보고되어 왔습니다.

Evi-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MECOM 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MECOM 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MECOM의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Evi-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Evi-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MECOM 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Evi-1 기능에 중요한 MECOM 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MECOM 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Evi-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Evi-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MECOM 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Evi-1 HDR 플라스미드 (h) 및 Evi-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MECOM 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MECOM 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.