Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ets-2 (m): sc-423871
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Ets-2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Ets-2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ets-2 Antibody (E-5): sc-365666
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ets-2 (m) | sc-423871 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin **Ets2** code le facteur de transcription **Ets-2** de la famille ETS, un régulateur se liant à l’ADN qui module des programmes d’expression génique contrôlant la prolifération, la différenciation, la survie et le remodelage de la matrice extracellulaire. Ets-2 intègre des signaux en aval des cascades kinasiques **MAPK/ERK** et apparentées, permettant des réponses transcriptionnelles dépendantes du stimulus qui façonnent l’activation des cellules immunitaires, les processus de développement et l’homéostasie tissulaire. Une activité d’ETS2 dérégulée a été associée, dans plusieurs systèmes modèles, à une expression altérée des gènes inflammatoires, à des comportements aberrants des cellules stromales et épithéliales, ainsi qu’à des réseaux transcriptionnels oncogéniques. En tant que régulateur transcriptionnel nodal, Ets-2 est couramment étudié pour ses rôles dans le contrôle transcriptionnel des cytokines, des métalloprotéinases matricielles et des gènes associés au cycle cellulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Ets-2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ets2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ets2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ets2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Ets-2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ets2 pour l'étude de la signalisation de Ets-2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ets2 essentiels à la fonction de Ets-2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ets2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Ets-2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Ets-2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ets2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Ets-2 plasmide HDR (m) et le Ets-2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ets2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ets2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.