Plasmide Double Nickase (h) ERRβ: sc-402868-NIC

ESRRB code le récepteur apparenté aux œstrogènes bêta (ERRβ), un récepteur nucléaire orphelin qui agit comme facteur de transcription spécifique de séquence, régulant des programmes géniques impliqués dans l’identité cellulaire, la différenciation et l’adaptation métabolique. ERRβ participe à la signalisation des récepteurs nucléaires en se liant à des éléments de réponse apparentés aux œstrogènes et en modulant la transcription de concert avec des co‑régulateurs, intégrant des signaux issus des voies du développement et des voies sensibles au stress. Dans les cellules humaines, l’activité d’ESRRB a été associée à la régulation de réseaux transcriptionnels de type « stem », à l’engagement de lignée, ainsi qu’à des programmes de métabolisme mitochondrial et oxydatif. Une signalisation ESRRB/ERRβ dérégulée a été étudiée dans des contextes d’états de différenciation altérés et de phénotypes prolifératifs, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques du contrôle transcriptionnel dans des modèles cellulaires pertinents pour les maladies.

ERRβ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ESRRB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ESRRB. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ESRRB. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ESRRB.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.